线粒体活性氧荧光探针是一类用于检测线粒体中活性氧（ROS）的工具，其灵敏度和实时性是重要的性能指标，以下是相关介绍：
一、灵敏度
高灵敏度的表现：许多线粒体活性氧荧光探针具有很高的灵敏度，能够检测到低浓度的活性氧。例如，MitoROS 线粒体活性氧荧光探针 580 可快速穿透活细胞膜并积聚于线粒体，被超氧化物（O??）氧化后荧光信号显著增强，能对线粒体中的超氧化物进行灵敏检测。MitoNeoD作为一种新型荧光探针，仅需 5-10μM 即可进行检测，对大多数细胞都适用，可快速灵敏地检测线粒体内超氧化物变化。
影响灵敏度的因素：探针的结构和性质对其灵敏度有重要影响，例如，MitoSOX Red中的氢化乙啶（HE）通过-(CH2)6-烷基链与三苯基膦基团共轭，这种结构使其与超氧阴离子（O??-）的反应速度较快，从而具有较高的灵敏度。此外，探针的浓度也会影响灵敏度，如MitoSOX Red建议使用 1μM 探针浓度对样本进行检测，浓度过高可能会导致细胞核出现非特异性信号，影响检测结果。
二、实时性
实时性的体现：线粒体活性氧荧光探针能够实时监测线粒体中活性氧的动态变化。如MitoROS线粒体活性氧荧光探针580氧化后荧光信号可显著增强，适用于实时动态监测超氧化物水平。线粒体OCR试剂基于纳米技术，具有优异的光稳定性，可通过荧光寿命测量技术实现细胞中氧浓度变化的实时跟踪，能连续测量时间长达数小时。
实现实时性的原理：一些探针通过与活性氧发生快速的化学反应，从而迅速产生荧光信号变化来实现实时监测，例如，MitoNeoD在线粒体内被超氧化物氧化为MitoNeoOH，并立即产生强烈的红色荧光，可快速反映线粒体内超氧化物的变化。双光子荧光寿命探针（TFP）能够实时监测线粒体中 H?O?和 ATP 在不同时间的变化，通过荧光寿命的改变来反映活性氧和能量代谢的动态情况。
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