线粒体膜电位荧光探针在衰老细胞模型中的ΔΨm研究

线粒体膜电位（ΔΨm）是调节线粒体呼吸速率、ATP合成和活性氧生成的关键生物能量参数，在衰老细胞模型中，ΔΨm通常会降低。线粒体膜电位荧光探针可用于研究衰老细胞模型中的ΔΨm，以下是相关介绍：

常用荧光探针类型

单体-聚集体转换型探针：以JC-1为代表，正常细胞线粒体膜电位正常时，JC-1通过线粒体膜极性进入线粒体内，形成发射红色荧光的多聚体；而衰老细胞线粒体跨膜电位去极化，JC-1从线粒体内释放，浓度降低，逆转为发射绿色荧光的单体形式。通过检测绿色和红色荧光强度的比值，可量化线粒体膜电位的变化。JC-1的替代品JC-10具有更高的溶解度、灵敏度和信号背景比，能更好地检测线粒体跨膜电位损失的细微变化。

单一荧光强度型探针：如TMRM（四甲基罗丹明甲酯），它带有正电荷，在ΔΨm存在时，受膜电位驱动向线粒体基质迁移，发射红色荧光。去极化时，探针外排导致荧光减弱，通过单一波长强度变化反映ΔΨm。在衰老细胞中，TMRM信号较弱且呈斑片状分布，反映出膜电位下降与功能障碍。

研究方法及应用

检测方法：将线粒体膜电位荧光探针与衰老细胞模型共同孵育，然后利用荧光酶标仪、细胞成像仪或流式细胞仪等设备进行检测。如使用JC-1探针时，检测JC-1单体的激发光可设置为490nm，发射光设置为530nm；检测JC-1聚合物时，激发光设置为525nm，发射光设置为590nm。用流式细胞仪检测时，绿色荧光通过FL-1通道检测，红色荧光通过FL-2通道检测。

应用案例：有研究设计并合成了对ΔΨm敏感的生物发光探针MAL，将其应用于小鼠衰老相关的ΔΨm变化评估中，结果表明烟酰胺核苷（NR）可逆转与衰老相关的线粒体去极化，揭示了NR作用机制的另一个重要方面。