产品介绍

Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒是一套用于监测细胞活力的专业工具。细胞活力可通过多种参数进行评估，本试剂盒通过检测磷脂酰丝氨酸（PS）外翻现象特异性监测细胞凋亡过程。在凋亡发生时，PS会从细胞膜内侧转移至外侧，其细胞表面暴露可作为凋亡早期/中期的普适性标志物，且该检测信号早于细胞形态学变化出现。

Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒采用小分子荧光探针Apopxin™ PS探针，其与PS的结合亲和力（Kd < 10 nM）显著高于膜联蛋白V。该探针与膜PS结合后呈现深红色荧光，兼具微孔板、荧光显微镜和流式细胞仪多平台兼容优势（常规凋亡检测试剂通常仅适用于单一平台）

样品实验方案

摘要

1.制备含测试化合物的细胞样本（96孔板：100 μL/孔；384孔板：25 μL/孔）

2.加入等体积的Apopxin™Deep Red工作溶液

3.在室温下孵育1小时

4.使用荧光酶标仪（底部读数模式，Ex/Em = 650/680 nm，截止波长665 nm）或配备 Cy5滤片的荧光显微镜检测荧光强度

工作液配制

取10 μL 100X Apopxin™Deep  Red（组分A）加入1 mL检测缓冲液（组分B），混匀配制成工作液

注：每孔需100 μL工作液，现配现用

实验操作流程

1.96孔板每孔加入10 μL 或者384孔板每孔加入2.5 μL 10x测试化合物母液（溶于PBS或指定缓冲液），空白对照孔（无细胞培养基）加入等量缓冲液

2.将细胞板置于5% CO?、37℃培养箱孵育（如：Jurkat细胞用星形孢菌素处理4-6小时）

*注：喜树碱等化合物在405 nm激发时可能因380-490 nm宽发射光谱导致假阳性*

3.在每个孔中添加100 μL /孔（96孔板）或25 μL /孔（384孔板）的Apopxin™Deep Red工作溶液。

4.室温避光下孵育细胞板≥1小时。

5.（特别针对悬浮细胞）800 rpm离心2分钟（关闭刹车功能）

6.使用荧光酶标仪（底部读数模式，Ex/Em = 650/680 nm，截止波长665 nm）或配备 Cy5滤片的荧光显微镜检测荧光强度

注：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！