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产地 | 美国 |
品牌 | AAT Bioquest |
货号 | 22502 |
用途 | 仅限科研 |
英文名称 | Live or Dead™ Fixable Dead Cell Staining Kit *Orange Fluorescence with 405 nm Excitation* |
包装规格 | 200 Tests |
纯度 | 95% |
CAS编号 | |
保质期 | 12个月 |
是否进口 | 是 |
样品实验方案
简要概述
1.在HHBS中制备样品(0.5 mL /测定)
2.替换为HHBS
3.将Stain It V550添加到细胞悬液中
4.在室温或37°C下将细胞染色20-60分钟
5.清洗细胞
6.修复细胞(可选)
7.使用适当的激发/发射滤光片,用流式细胞仪和/或荧光显微镜检查样品
溶液配制
1.储备溶液配制
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Stain It V550储备溶液(500X):
将200 μL DMSO(组分B)添加到Stain It V550(组分A)的小瓶中,得到500X Stain It V550储备液。
点击查看细胞制备方案
样品示例及操作
1.使用1X Hanks和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的无叠氮化钠和无血清/蛋白质的缓冲液制备细胞。
2.用HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液洗涤细胞一次。
3.以5-10×106 / mL的浓度在HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液中重悬细胞。
4.将1 μL 500X Stain It Violet 550储备溶液添加到0.5 mL细胞/测定中,并充分混合。
5.在室温或37°C,5%CO2的培养箱中避光保存20-60分钟。 注意:应根据不同细胞系实验确定*的染色浓度和孵育时间。
6.洗涤细胞两次,然后用HHBS或您选择的缓冲液重悬细胞。
7.根据需要固定细胞(可选)。
8.使用适当的激发/发射滤光片,使用流式细胞仪和/或荧光显微镜分析细胞。