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| 产地 | 美国 |
| 品牌 | AAT Bioquest |
| 货号 | 21104 |
| 用途 | 仅限科研 |
| 英文名称 | Fluo-8FF™, AM |
| 包装规格 | 10x50 ug |
| 纯度 | 95% |
| CAS编号 | |
| 保质期 | 12个月 |
| 是否进口 | 是 |
钙离子荧光探针Fluo-8FF, AM 是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针 ，钙测量对于许多生物学研究至关重要。在结合Ca2+后显示光谱响应的荧光探针使研究人员能够使用荧光显微镜，流式细胞仪，荧光光谱和荧光酶标仪来研究细胞内游离Ca2+浓度的变化。在可见光激发钙指示剂中，Fluo-3和Fluo-4最常用。但是，Fluo-3 AM和Fluo-4 AM在酯酶水解后在活细胞中仅适度发荧光，并且需要苛刻的细胞加载条件才能*化其细胞钙反应。
产品简介
钙离子荧光探针Fluo-8FF, AM 是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，钙测量对于许多生物学研究至关重要。在结合Ca2+后显示光谱响应的荧光探针使研究人员能够使用荧光显微镜，流式细胞仪，荧光光谱和荧光酶标仪来研究细胞内游离Ca2+浓度的变化。在可见光激发钙指示剂中，Fluo-3和Fluo-4常用。但是，Fluo-3 AM和Fluo-4 AM在酯酶水解后在活细胞中仅适度发荧光，并且需要苛刻的细胞加载条件才能其细胞钙反应。
适用仪器
| 荧光显微镜 | |
| Ex: | FITC 滤波片组 |
| Em： | FITC 滤波片组 |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 490 nm |
| Em： | 525 nm |
| Cutoff： | 515 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式: | 底读模式/可分液处理 |
实验方案
储备溶液配制
所有未使用的储备液需分装为单次用量，于-20°C避光保存，避免反复冻融
Fluo-8FF® AM 储备液
用高质量无水 DMSO 制备 2 - 5 mM Fluo-8FF® AM 储备溶液。
工作溶液配制
Fluo-8FF® AM 工作溶液
在实验当天，将Fluo-8FF AM溶解在DMSO中，或将储备溶液的等分试样解冻至室温。，用含0.04% Pluronic® F-127的缓冲液（如Hanks-Hepes）稀释至2-20 μM。大多数细胞系，建议使用终浓度为 4-5 μM 的 Fluo-8L® AM。必须需根据细胞类型调整浓度
注意： 1.Pluronic® F-127 可增强 Fluo-8FF® AM 的水溶性。可以从百萤进行购买。
2.若细胞存在有机阴离子转运体，建议在工作液中添加1-2 mM丙磺舒（孔内终浓度0.5-1 mM）以防止水解产物外排。多种形式的丙磺舒产品，包括水溶性、钠盐和稳定溶液，可从百萤购买。
操作步骤
以下是推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。本方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。
1.在生长培养基中制备细胞过夜。
2. 天，将 1X Fluo-8FF® AM 工作溶液添加到孔板中。
注意：如果您的化合物会干扰血清，请在加载染料之前用新鲜的 HHBS 缓冲液替换生长培养基。
3.将加入染料的孔板在37°C的细胞培养箱中培养30至60分钟。
注意 将染料孵育 2 小时以上可以提高某些细胞系的信号强度。
4.用 HHBS 或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，例如 1 mM 丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。
5.根据需要添加刺激物，同时使用配备有 FITC 滤光片组的荧光显微镜或 FDSS、FLIPR 或 FlexStation的荧光板读取器在 490/525 nm 截止波长 515 nm 处检测荧光。
