FAM- VAD -FMK探针进入每个细胞与共价结合到驻留在胱天蛋白酶活性的异二聚体的VAD-FMK，从而抑制酶活性的反应性半胱氨酸残基。结合的标记试剂被保留在细胞内，而任何未结合的试剂将扩散出细胞，并冲走。绿色荧光信号的直接测量活性胱天蛋白酶的存在于细胞中的试剂加入的时间量。含有结合的标记试剂细胞可以通过96 - 孔板的基于荧光，荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。该探头具有光谱性质类似于Pacific Blue®和BD Horizon V450 ，Pacific Blue这样的过滤器®和BD Horizon V450可以方便的用流式细胞仪或显微镜使用。该探头是特别设计用于多色检测半胱氨酸蛋白酶与紫激光装备 。