Cal 520 AM 一旦进入细胞内，其亲脂基团就会被剪切酶水解成一个带阴性负离子的荧光染料被阻断在细胞内。它与钙离子结合其荧光就会显著的增强。当细胞内的细胞器受到刺激就会释放出钙离子， Cal-520 的荧光信号就会显著的增加。长波长、高灵敏性、大于100倍的荧光信号增强使得 Cal-520 AM成为一个理想的细胞内钙离子测量指示器。高的信噪比和极好的细胞内滞留使得Cal-520 在测评 GPCR 和钙离子通道目标及他们的受体激动剂和拮抗剂的筛选方面相比其他钙离子探针显现更加*的优越性。 Cal-520 钠盐或者钾盐是在细胞内水解了的 Cal-520 AM。它选择性的与钙离子结合，它的荧光强度与钙离子浓度正向相关。