样品实验方案

储备溶液配制

1.洗涤缓冲液

将50 ml洗涤缓冲液浓缩液添加到950 ml蒸馏水或去离子水中（足以完成1个板的所有洗涤步骤）。如果在20倍浓缩物中形成了晶体，则将其升至室温并轻轻混合以溶解。

2.样品稀释液

通过用蒸馏水或去离子水将样品稀释液浓缩液稀释5倍来准备所需体积的样品稀释液。对于每个板，将30 ml样品稀释液添加到120 ml水中。

3.样品

所有样品均应在样品稀释液中稀释至少2倍。除去可见的沉淀物并在聚丙烯管/板中稀释，应在样品之前添加缓冲液。高度溶血的样品可能会导致定量结果不准确。含有超出分析标准范围的高水平分析物的样品将需要进一步稀释。

4.小鼠血清/血浆稀释指南

根据对BALB / c和C57BL / 6样品的重复分析，我们建议稀释倍数为200,000X。移液非常重要，在稀释步骤之间更换吸头，并使用新鲜制成的稀释液。试剂的含量足以重复使用。

5. ELISA标准

通过添加1 ml标准重构缓冲液将ELISA标准液重构为1μg/ ml的原液。不要搅拌。让标准液溶解20分钟并 混合。标准液应等份保存在-20°C下。避免重复冻融循环。

6.编制标准曲线

如图所示，稀释标准储备溶液以创建标准曲线。指示的数量足以重复。*一个样品瓶用作测定背景对照，即应省略标准液。在使用30分钟内准备标准曲线。