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产地 | 美国 |
品牌 | AAT Bioquest |
货号 | V101050 |
用途 | 化学试剂 |
英文名称 | Amplite® Human Apolipoprotein B (ApoB) Kit *Optimized For ELISA Development with ALP* |
包装规格 | 96 Tests |
纯度 | 95% |
CAS编号 | |
别名 | |
分子式 | |
是否进口 | 是 |
用于定量测定血清/血浆样品和细胞培养上清液中的猴载脂蛋白B(apoB)。请注意,洗涤,封闭和孵育缓冲液应包含清洁剂。吐温20,Triton X-100或NP40的使用浓度为0.05-0.5%。在封闭缓冲液和孵育缓冲液中,建议使用0.1%BSA。
样品实验方案
操作步骤
通过添加100μl/孔,用mAb LDL 20/17涂覆高蛋白结合ELISA板,将其在pH 7.4的PBS中稀释至2μg/ ml。在4-8°C下孵育过夜。
用PBS(200μl/孔)洗涤两次。
通过添加200μl/孔的PBS和含有0.1%BSA(孵育缓冲液)的0.05%Tween 20来封闭板。在室温下孵育1小时。
用含有0.05%Tween的PBS洗涤五次。
apoB标准品是由50%甘油稳定的纯化LDL。浓度为125μg/ ml。对于测试,请使用标准范围作为指导来准备原液的稀释液。
加入100μl/孔的样品或在血清或血浆样品的孵育缓冲液或Apo ELISA缓冲液中稀释的标准液,并在室温下孵育1-2小时。请注意上述血清/血浆样品的特殊注意事项。
按照步骤4进行清洗。
在孵育缓冲液或Apo ELISA缓冲液中以100μl/孔的浓度添加1μg/ ml的mAb LDL 11-生物素用于血清/血浆样品。在室温下孵育1小时。
按照步骤4进行清洗。
在孵育缓冲液中以100:1 /孔的比例稀释1:1000的链霉亲和素ALP。在室温下孵育1小时。
按照步骤4进行清洗。
加入100μl/孔的适当底物溶液,例如对硝基苯基磷酸酯(pNPP)。
在合适的显影时间后,在ELISA酶标仪中测量光密度(对于pNPP为405 nm)。