游离cAMP从HRP-cAMP /抗cAMP抗体复合物中取代了荧光cAMP示踪剂。抗cAMP抗体用我们的TR Fluor Eu标记，而cAMP示踪剂包含我们的trFluor 650。在没有cAMP的情况下，trFluor 650-cAMP缀合物仅与TR Fluor Eu标记的抗cAMP抗体结合。但是，测试样品中未标记的游离cAMP竞争TR Fluor Eu标记的抗cAMP抗体偶联物，因此抑制了trFluor 650-cAMP与抗cAMP抗体的结合。 trFluor 650标记的cAMP示踪剂仅具有纳秒级的荧光寿命，而TR Fluor Eu标记的抗cAMP抗体结合的荧光cAMP示踪剂由于TR-FRET而具有更长的荧光寿命值。